NeutrAvidina - NeutrAvidin

NeutrAvidin proteína es una de glicosilada versión de pollo avidina , con una masa de aproximadamente 60.000 daltons . Como resultado de la eliminación de carbohidratos , la unión de lectina se reduce a niveles indetectables, pero la afinidad de unión de biotina se conserva porque el carbohidrato no es necesario para esta actividad. La avidina tiene un pI alto, pero NeutrAvidin tiene un pI casi neutro (pH 6,3), lo que minimiza las interacciones no específicas con la superficie celular cargada negativamente o con el ADN / ARN. La neutravidina todavía tiene residuos de lisina que permanecen disponibles para derivatización o conjugación .

Como la propia avidina, NeutrAvidin es un tetrámero con una fuerte afinidad por la biotina ( K d = 10-15 M). En aplicaciones bioquímicas , la estreptavidina , que también se une muy estrechamente a la biotina, puede usarse indistintamente con NeutrAvidin.

La avidina inmovilizada sobre soportes sólidos también se usa como medio de purificación para capturar proteínas marcadas con biotina o moléculas de ácido nucleico . Por ejemplo, las proteínas de la superficie celular pueden marcarse específicamente con reactivo de biotina impermeable a la membrana y luego capturarse específicamente usando un soporte de NeutrAvidin.

Referencias

  1. Bayer, Ed: " El complejo avidina-biotina ", Departamento de Química Biológica, Instituto de Ciencias Weizmann, Israel

Y. Hiller, JM Gershoni, EA Bayer, M. Wilchek Biochem. J., 248 (1987), págs. 167-171

EA Bayer, F. De Meester, T. Kulik, M. Wilchek Appl. Biochem. Biotechnol., 53 (1995), págs. 1-9

AT Marttilaa et al. FEBS Letters 467 (2000), págs. 31-36 Avidina NeutraLite recombinante: un mutante ácido no glicosilado de la avidina de pollo que exhibe alta afinidad por la biotina y bajas propiedades de unión no específicas