Vibratome - Vibratome
Un vibratomo es un instrumento que se utiliza para cortar rodajas finas de material (aunque, por lo general, rodajas más gruesas que las que se cortan en muestras incrustadas en parafina con un micrótomo ). Es similar a un micrótomo pero usa una cuchilla vibratoria para cortar el tejido . La amplitud de vibración , la velocidad y el ángulo de la hoja se pueden controlar. Los trozos de tejido fijos o frescos se incrustan en agarosa de baja temperatura de gelificación . El bloque de agarosa resultante que contiene la pieza de tejido se une a un bloque de metal y se secciona mientras se sumerge en un baño de agua o tampón. A continuación, las secciones individuales se recogen con un cepillo fino y se transfieren a portaobjetos o placas de pocillos múltiples para su tinción.
Vibratome no es un nombre genérico, sino una marca registrada de Leica Biosystems Richmond, Inc. en EE. UU.
Ventajas
- No es necesario deshidratar los tejidos antes de incrustarlos, lo que reduce la pérdida de componentes celulares.
- Sin incrustaciones de parafina sucias
- Permite la inclusión de tejido en agarosa para proporcionar estabilidad de corte
- No es necesario desparafinar y rehidratar las secciones antes de la inmunotinción
- Sin altas temperaturas ni tratamientos químicos agresivos que puedan provocar inestabilidad del antígeno
- No se requieren hojas de micrótomo especiales
- Menos posibilidades de que aparezcan artefactos causados por la incorporación o congelación de parafina
- Disminución de la autofluorescencia del tejido debido a que se evita la fijación con formalina y la inclusión en parafina
- Menos tiempo de espera desde la toma de muestras de tejido hasta el momento del inmunomarcaje
- Permite la creación directa de secciones flotantes para inmunohistoquímica
Desventajas
- En lugar de cintas, se cortan y recogen secciones individuales que son más delicadas y difíciles de manipular.
- Las secciones son generalmente más gruesas que las obtenidas con métodos de parafina; la penetración de anticuerpos y otros reactivos puede ser más lenta y, por lo tanto, pueden ser necesarios tiempos de incubación más largos. Además, las secciones gruesas pueden ser difíciles de obtener con el microscopio. (Sin embargo, las secciones gruesas son compatibles y, a veces, incluso deseables si se usa microscopía confocal).
- Asegurar las secciones del vibrátomo a los portaobjetos de vidrio puede ser difícil o imposible debido al grosor de las secciones.