Pseudotipado - Pseudotyping
La pseudotipificación es el proceso de producción de virus o vectores virales en combinación con proteínas de envoltura viral extrañas . El resultado es una partícula de virus pseudotipada, también llamada pseudovirus . Con este método, las proteínas de la envoltura viral extraña pueden usarse para alterar el tropismo del hospedador o aumentar o disminuir la estabilidad de las partículas del virus. Las partículas pseudotipadas no transportan el material genético para producir proteínas de envoltura viral adicionales, por lo que los cambios fenotípicos no pueden transmitirse a las partículas virales de la progenie. En algunos casos, la incapacidad de producir proteínas de la envoltura viral hace que la replicación del pseudovirus sea incompetente . De esta manera, las propiedades de los virus peligrosos se pueden estudiar en un entorno de menor riesgo.
La pseudotipificación permite controlar la expresión de las proteínas de la envoltura. Una proteína de uso frecuente es la glicoproteína G (VSV-G) del virus de la estomatitis vesicular (VSV) que media la entrada a través del receptor de LDL . Las proteínas de la envoltura incorporadas en el pseudovirus permiten que el virus entre fácilmente en diferentes tipos de células con el correspondiente receptor del huésped .
Desarrollo de vacunas
Se pueden usar virus pseudotipados para vacunar animales contra proteínas expresadas en la envoltura del virión. Este enfoque ha sido utilizado para producir vacunas candidatas contra el VIH , Nipah henipavirus , rabia lisavirus , el SARS-CoV , Zaire ebolavirus , y el SARS-CoV-2 . El virus de la estomatitis vesicular recombinante: el virus del Ébola del Zaire (rVSV-ZEBOV) fue creado por la Agencia de Salud Pública de Canadá (PHAC) y actualmente está autorizado en la Unión Europea y los Estados Unidos para la prevención de la enfermedad del Ébolavirus (EVE) causada por el ébola del Zaire .
Pruebas serológicas
Los virus pseudotipados, especialmente los virus pseudotipados que portan un gen de luciferasa recombinante (rLuc), pueden usarse para probar si un tratamiento puede proteger la infección de las células huésped. Por ejemplo, se extrae sangre de un animal con inmunidad serológica a un virus. Se genera un pseudovirus separado con una proteína de la envoltura del virus al que el animal tiene inmunidad. El pseudovirus está además diseñado para contener un gen de luciferasa. Cuando la sangre extraída del animal se mezcla con el pseudovirus, los anticuerpos protectores se unen y neutralizan la proteína de la envoltura introducida. En cultivo celular , se evitará que los pseudovirus neutralizados infecten células y produzcan el producto del gen indicador luminiscente. Cuando se analizan, las muestras de cultivo celular en las que está presente un inhibidor eficaz del virus tendrán una luminiscencia reducida.